更新時(shí)間:2024-08-07
脂質(zhì)體包括的氯膦酸二鈉脂質(zhì)體和PBS,用于小鼠等動(dòng)物體外或者體外清除單核巨噬細(xì)胞。ClodronateLiposomes巨噬細(xì)胞清除套裝。
ClodronateLiposomes巨噬細(xì)胞清除套裝
品牌 | LIPOSOMA | 貨號(hào) | CP-005-005 |
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規(guī)格 | 5ml+5ml | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | ClodronateLiposomes(氯膦酸二鈉脂質(zhì)體+PBS對(duì)照脂質(zhì)體) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物科研,醫(yī)學(xué)研究, |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
清除巨噬細(xì)胞(depletion of macrophages)是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開(kāi)發(fā)的一款Clodronate Liposomes,可以利用巨噬細(xì)胞的內(nèi)吞機(jī)制,將脂質(zhì)體包裹的膜不通透性的氯磷酸(clodronate)帶入細(xì)胞內(nèi),利用“特洛伊木馬機(jī)制”從而達(dá)到去除巨噬細(xì)胞的目的。
作用原理:
兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,磷脂雙分子層中間通過(guò)水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質(zhì)體的過(guò)程中被包裹進(jìn)磷脂雙分子層之間的水相中(如圖1)。游離的氯磷酸鹽不能自由的通過(guò)脂質(zhì)體的磷脂雙分子層。隨著脂質(zhì)體被巨噬細(xì)胞吞噬,在巨噬細(xì)胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來(lái),并累積在細(xì)胞內(nèi),當(dāng)其達(dá)到一定濃度時(shí),巨噬細(xì)胞將會(huì)受到不可逆轉(zhuǎn)的損傷,從而進(jìn)入凋亡過(guò)程。從死亡的巨噬細(xì)胞中釋放出來(lái)的氯磷酸鹽在細(xì)胞外的半衰期極短(大約15min),可以通過(guò)泌尿系統(tǒng)排除體外。
CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)
SKU: CP-005-005
Category: Liposomal formulations
clodronateliposomes脂質(zhì)體CP-005-005構(gòu)成:
氯膦酸鹽脂質(zhì)體:
由同心磷脂雙層構(gòu)成的人造球,該雙層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS(磷酸鹽緩沖液)水溶液。脂質(zhì)體是顆粒,大小大。3微米。它們?cè)赑BS中形成懸浮液,在儲(chǔ)存時(shí)會(huì)沉淀,在試管或燒瓶的底部形成沉淀。在對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥之前,應(yīng)先搖晃懸浮液,以回收均勻的懸浮液。
對(duì)照脂質(zhì)體(PBS):
對(duì)照脂質(zhì)體不含氯膦酸鹽。它們僅含有PBS,可用于對(duì)照實(shí)驗(yàn),以查明注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體后觀察到的效果是否僅是由于巨噬細(xì)胞耗竭所致。
磷脂雙層由磷脂酰膽堿和膽固醇組成。將所有脂質(zhì)體制劑懸浮在無(wú)菌磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中:
– 10 mM的Na2HPO4;
– 10毫米NaH2PO4;
– 140毫米氯化鈉。
我們所有的脂質(zhì)體均帶負(fù)電荷,因此不會(huì)一起阻塞。懸浮液中的脂質(zhì)體沒(méi)有大小,這意味著它也包含越來(lái)越大的脂質(zhì)體(大3微米)。平均而言,脂質(zhì)體的大小為1.7微米。
氯膦酸鹽脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,包裹了氯膦酸鹽。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為。5毫克/毫升 氯膦酸鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝在脂質(zhì)體囊泡中。
PBS脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽,可用于對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
熒光DiI脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包封了PBS水溶液,并用熒光染料DiI標(biāo)記。它們不含氯膦酸鹽,可用于研究通過(guò)特定給藥途徑注射的脂質(zhì)體是否能夠到達(dá)要研究的巨噬細(xì)胞。
到達(dá)脂質(zhì)體后,應(yīng)將其儲(chǔ)存在4 – 8ºC(或39 – 47ºF)之間。脂質(zhì)體懸浮液不得冷凍,也不要暴露于高溫下。這可能會(huì)對(duì)磷脂雙層造成干擾,可能導(dǎo)致氯膦酸鹽從脂質(zhì)體中泄漏出來(lái)。
給藥前,首先使脂質(zhì)體達(dá)到室溫,然后輕輕搖動(dòng)或攪拌懸浮液。一段時(shí)間后,脂質(zhì)體易于沉淀,導(dǎo)致小瓶中的分布不均勻。當(dāng)注射花費(fèi)太多時(shí)間時(shí),脂質(zhì)體甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只動(dòng)物,可能會(huì)導(dǎo)致劑量不同。
不建議稀釋?xiě)腋∫海缬斜匾?qǐng)使用PBS或鹽水。
我們建議客戶(hù)在發(fā)貨后16周內(nèi)使用脂質(zhì)體制劑。強(qiáng)烈建議不要在到期日期之后使用。在此期間之后,污染的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加,并且可能會(huì)發(fā)生輕微的功能喪失。
巨噬細(xì)胞在免疫和非免疫防御機(jī)制中起重要作用。它們是抵御滲透到脊椎動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)菌,病毒和其他形式的微生物污染的首道防線(xiàn)。巨噬細(xì)胞是大型細(xì)胞,幾乎存在于所有身體組織中,它們可以具有不同的形式和名稱(chēng)(例如庫(kù)普弗細(xì)胞,肺泡巨噬細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞,破骨細(xì)胞,紅髓巨噬細(xì)胞)。巨噬細(xì)胞“清除”,它們攝入并消化可能是潛在病原體的所有異物,微生物,癌細(xì)胞和細(xì)胞碎片。該過(guò)程稱(chēng)為吞噬作用。巨噬細(xì)胞主要通過(guò)可溶性分子如細(xì)胞因子和趨化因子的介導(dǎo)來(lái)進(jìn)一步調(diào)節(jié)許多非吞噬細(xì)胞的功能。他們參與先天免疫,
脂質(zhì)體是人工制備的球體,由同心磷脂雙層組成。當(dāng)磷脂分散在水中時(shí),親水性頭部將構(gòu)成脂質(zhì)體的兩個(gè)外部部分,而疏水性脂肪酸基團(tuán)將構(gòu)成內(nèi)部部分(見(jiàn)圖1)。水室分隔雙層,親水分子可以溶解在其中,形成脂質(zhì)體包封的分子。氯膦酸鹽(二氯亞甲基雙膦酸酯或Cl2MBP)是一種親水性分子,可以封裝在磷脂雙層中。游離氯膦酸鹽不易穿過(guò)細(xì)胞膜,并通過(guò)腎臟系統(tǒng)從循環(huán)中迅速清除(即數(shù)分鐘內(nèi))。但是,氯膦酸鹽脂質(zhì)體包埋在脂質(zhì)體中時(shí),會(huì)被巨噬細(xì)胞吞噬,無(wú)法逃脫(見(jiàn)圖2)。磷脂雙層被溶酶體磷脂酶消化,而氯膦酸鹽未被消化并且保留在巨噬細(xì)胞中。巨噬細(xì)胞攝入的磷脂雙層和脂質(zhì)體越多,在巨噬細(xì)胞內(nèi)積累的氯膦酸鹽越多。超過(guò)一定的細(xì)胞內(nèi)濃度,氯膦酸鹽將通過(guò)啟動(dòng)程序性細(xì)胞死亡(即凋亡)來(lái)消除巨噬細(xì)胞。
圖1.氯膦酸鹽脂質(zhì)體的示意圖。囊泡由同心的磷脂雙層構(gòu)成,被水性隔室隔開(kāi)。雙層由親水和疏水基團(tuán)組成。將氯膦酸鹽(在此以黑色方塊表示)溶解在水溶液中并封裝在脂質(zhì)體內(nèi)。
圖2.巨噬細(xì)胞對(duì)氯膦酸鹽脂質(zhì)體的攝取和消化示意圖。巨噬細(xì)胞通過(guò)胞吞作用攝入氯膦酸鹽脂質(zhì)體,然后與含有磷脂酶的溶酶體(L)融合(箭頭)。磷脂酶破壞的磷脂雙層越多,在巨噬細(xì)胞內(nèi)釋放的氯膦酸鹽(黑色方塊)越多。巨噬細(xì)胞終通過(guò)凋亡被殺死。(N =巨噬細(xì)胞核)。
因此,氯膦酸鹽脂質(zhì)體可用于通過(guò)消耗巨噬細(xì)胞來(lái)研究巨噬細(xì)胞功能。例如,它們可以應(yīng)用于各種自身免疫性疾病,移植,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和基因治療的模型。氯膦酸鹽脂質(zhì)體只有在可以達(dá)到的情況下才能耗盡巨噬細(xì)胞。一些組織可以形成脂質(zhì)體的屏障。通過(guò)選擇氯膦酸鹽脂質(zhì)體的正確給藥途徑,可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細(xì)胞。有關(guān)管理協(xié)議的更多信息,請(qǐng)單擊此處。
PBS脂質(zhì)體主要用于對(duì)照實(shí)驗(yàn)。但是,這些也可以在某些時(shí)間段內(nèi)通過(guò)飽和來(lái)阻止吞噬作用。因此,PBS脂質(zhì)體不能代表正常健康的,未阻斷的,未抑制的和未活化的巨噬細(xì)胞的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。當(dāng)比較氯膦酸鹽脂質(zhì)體和PBS脂質(zhì)體的作用時(shí),其作用因此可能小于預(yù)期。
有關(guān)更多信息,請(qǐng)參見(jiàn):
– Van Rooijen,N.和Sanders,A.(1994)。脂質(zhì)體介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞耗竭:作用機(jī)理,脂質(zhì)體制備和應(yīng)用。免疫學(xué)雜志,174(1-2),83-93。
– Van Rooijen,N.,Sanders,A.和van den Berg,TK(1996)。脂質(zhì)體介導(dǎo)的氯膦酸鹽和丙am的細(xì)胞內(nèi)遞送誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡。免疫學(xué)雜志,193(1),93-99。
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