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線栓法MCAO大鼠腦缺血模型的拴線使用制備技巧

更新時間:2023-04-24   點擊次數:1703次

背景介紹


大鼠MCAO模型,不成功的一個常見原因,就是栓線插入深度不夠,即栓線的前端未進入大腦前動脈(ACA),拴線的粗細倒是次要的,0.20~0.26mm均可。因此,保證栓線進入ACA并阻斷對側來的血流,而又不刺破血管是重中之重。


如圖1尼龍線光滑的末端,不僅大大減輕了插線對血管內皮的損傷,降低了刺穿血管的可能性,而且可以更嚴密的阻斷從大腦前動脈供應的來自對側的血流,更為可貴的是,因為球端直徑為0.32mm,插線時可以非常方便的插到位(如圖2)。


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制備技巧


技巧1:許多文獻報道插入深度為18.5±0.5mm(270g左右大鼠),如果按這一標準去做,而不考慮大鼠的個體差異,后果是缺血的程度參差不齊,很多大鼠會出現癥狀較輕,甚至無癥狀。建議當插線近18mm(做上標記)時,注意手的感覺,輕緩推進,直至感覺到阻力為止(當遇到阻力后,再插線會見到線彎曲)。可能有人會說,把血管插破了也未感覺到阻力或線遇阻后的彎曲。一個原因是線太硬(建議選擇Doccol),另一主要原因是當栓線從血管切口插入后為防止血液從此處流出,需要結扎一條細線,這條線結扎的松緊程度很關鍵,應在不流血的情況下盡可能的松,這樣你會發現進線時很輕松,一旦遇到阻力,就會感覺到。后者至關重要,請體會,就是常說的手法或者手感。


技巧2:栓線一旦進入ACA,就要把上面提到的那根細線適度扎緊(“適度"很重要,會影響到再灌流時大鼠的生死存亡),此時的關鍵是動作輕柔,不要使ICA有任何的牽拉,否則栓線會脫出ACA,可能會造成缺血失敗。血管外的栓線不要留得過長,更不要縫在皮外,大鼠醒來后會自己拔出。

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